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牛乳中乳糖含量測定

更新時(shí)間:2021-06-22      點(diǎn)擊次數:16093

乳制品牛乳中乳糖含量測定分析

1. 介紹

乳糖是兒童生長(cháng)發(fā)育的主要營(yíng)養物質(zhì)之一,對青少年智力發(fā)育十分重要,特別是新生嬰兒*的,在自然界中只有哺乳類(lèi)動(dòng)物的奶中含有乳糖,各類(lèi)植物性食物中是不含乳糖的一分子乳糖消化可得一分子葡萄糖和一分子半乳糖。半乳糖能促進(jìn)腦苷脂類(lèi)和黏多糖類(lèi)的生成,因而對幼兒智力發(fā)育非常重要。乳制品企業(yè)通常通過(guò)測定牛乳中半乳糖的含量來(lái)計算牛乳中乳糖的含量。

 

2. 實(shí)驗

設備:

ELSD3300蒸發(fā)光散射檢測器

Agilent 1260 HPLCC.01.07

試劑及耗材:

流動(dòng)相A:超純水

流動(dòng)相B:色譜純乙腈

色譜柱:Beksich糖柱,4.6*250mm,5um

(貨號:Bek445101

溫箱溫度:

30C

樣品:

牛乳樣品提取物

樣品預處理: 

樣品經(jīng)蛋白沉淀后,0.45um濾膜過(guò)濾后取上清液待上樣

進(jìn)樣體積:

20ul

按78%乙腈22%梯度比例進(jìn)行檢測,運行時(shí)間為20min

流動(dòng)相流速:

0.9ml/min

 

樣品檢測:

樣品配置好后置于自動(dòng)進(jìn)樣器中,使用編輯好的方法進(jìn)行自動(dòng)進(jìn)樣分析

3. 結果

 ELSD3300蒸發(fā)光散射檢測器測定牛乳乳糖含量

結果見(jiàn)表1。

 1:乳糖定量檢測,*個(gè)峰為半乳糖

 

表2:半乳糖葡萄糖分離度拖尾因子情況

 

 3:半乳糖定量曲線(xiàn)

 

 R=0.99903

本次實(shí)驗的難點(diǎn)是樣品沒(méi)有紫外吸收,樣品水溶性強,需用乙腈稀釋?zhuān)?/span>半乳糖和葡萄糖不易達到基線(xiàn)分離。且ELSD3300運行參數如氣體流速和檢測溫度以及增益值必須優(yōu)化。

 

4. 結論

本方法使用ELSD3300測定了牛乳中半乳糖的含量,半乳糖和葡萄糖實(shí)現了基線(xiàn)分離,ELSD3300有平衡時(shí)間短,基線(xiàn)噪音小,重現性高和線(xiàn)性好等特點(diǎn)。

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