層析柱是凝膠層析技術(shù)中的主體，一般用玻璃管或有機玻璃管。根據樣品混合物中各組分在固定相和流動(dòng)相中分配系數不同，從而分離的一種層析法。
 

　　層析柱的直徑大小不影響分離度，樣品用量大，可加大柱的直徑，一般制備用凝膠柱，直徑大于2厘米，但在加樣時(shí)應將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。
 

　　層析柱樣品用量大，可加大柱的直徑，一般制備用凝膠柱，直徑大于2厘米，但在加樣時(shí)應將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。此外， 直徑加大，洗脫液體體積增大，樣品稀釋度大。分離度取決于柱高，為分離不同組分，凝膠柱床必須有適宜的高度，分離度與柱高的平方根相關(guān)，但由于軟凝膠柱過(guò)高擠壓變形阻塞，一般不超過(guò)1米。
 

　　此外， 直徑加大，洗脫液體體積增大，樣品稀釋度大。分離度取決于柱高，為分離不同組分，凝膠柱床必須有適宜的高度，分離度與柱高的平方根相關(guān)，但由于軟凝膠柱過(guò)高擠壓變形阻塞，一般不超過(guò)1米。
 

　　分族分離時(shí)用短柱，一般凝膠柱長(cháng)20-30厘米，柱高與直徑的比較5:1─10:1，凝膠床體積為樣品溶液體積的4-10倍。 分級分離時(shí)柱高與直徑之線(xiàn)為20:1─100:1，常用凝膠柱有50×25厘米，10×25厘米。
 

　　層析柱濾板下的死體積應盡可能的小，如果支掌濾板下的死體積大，被分離組分之間重新混合的可能性就大，其結果是影響洗脫峰形，出現拖尾出象，降低分辯力。在分離時(shí)，死體積不能超過(guò)總床體積的1/1000。